Home - Rasfoiesc.com
Educatie Sanatate Inginerie Business Familie Hobby Legal
Ca sa traiesti o viata sanatoasa.vindecarea bolilor animalelor, protectia si ingrijirea, cresterea animalelor, bolile animalelor




Alimentatie Asistenta sociala Frumusete Medicina Medicina veterinara Retete

Medicina


Index » sanatate » Medicina
DETERMINAREA PROTEINELOR PRIN METODA BIURET


DETERMINAREA PROTEINELOR PRIN METODA BIURET




DETERMINAREA PROTEINELOR PRIN METODA BIURET

Principiul metodei

Compusul Biuret H2N C NH C NH2 formeaza un complex cu

‌‌‌‌║ ║

O O

ionul Cu2+ in mediu basic cu o culoare violet .




In mod similar , compusii polipeptidici ( de la 4 unitati in sus ) formeaza complexi colorati cu ionul Cu2+ .

Intensitatea culorii este proportionala cu concentratia proteinelor si se determina spectrofotometric .

‌│ │

HN : NH

‌│ │

O=C C=O

│ │

R1-HC Cu2+ CH-R3

│ │

HN: :NH

│ │

O=C C=O

R2-HC CH-R4

│ │

Formarea complexului cupric cu electronii neparticipanti

ai atomilor de azot implicate in legatura peptidica



Reactivi

reactiv Biuret : 45 g tartrat de sodium si potasiu

15 g CuSO4 x 5H2O

8g NaOH

5 g KI

ad 1000 ml apa distilata

albumina serica bobina solutie 1 g %

Mod de lucru :

ml proba biologica se pun intr-o eprubeta curate . Se adauga 0 ml apa distilata si se agita bine . Se adaugaapoi 4 ml reactive Biuret , se agita si se lasa la temperature laboratorului 25 de minute .

Pregatirea martorului : peste 1 ml apa distilata se adauga 4 ml reactiv Biuret , se agita si se lasa la temperatura laboratorului 25 de minute .

Pregatirea standardului : la 1 ml solutie albumina serica bovina 1 g % se adauga 4 ml reactiv Biuret , se agita si se lasa la temperature laboratorului 25 de minute .

Se citeste absorbanta la 540 nm .

Calcul

Proteina totala g/dl = ΔAp / Δ ASt 1








Politica de confidentialitate





Copyright © 2021 - Toate drepturile rezervate