DETERMINAREA ACTIVITATII LIPAZEI

DETERMINAREA ACTIVITATII LIPAZEI

Activitatea lipazei este dependenta de originea acesteia ( microbiana sau animala ) .

Metoda descrisa mai jos urmareste aprecierea activitatii enzimatice prin evaluarea titrimetrica a acizilor grasi rezultati in urma hidrolizei .

Materiale si metoda

solutie substrat - emulsie de ulei de masline : 1 g ulei de masline se amesteca cu etanol absolute si se aduce la 100 ml cu etanol absolute . Inainte de utilizare emulsia se agita bine .

solutie enzimatica obtinuta prin triturarea unui comprimat de Mezym forte in mojar si extractia produsului fin pulverizat obtinut cu ser fiziologic tamponat timp de 30 min. la temperatura camerei , urmata de filtrarea solutiei ;

solutie NaCl 3 M ;

solutie CaCl₂ 0,075 M ;

solutie 0,0027 M taurocolat de sodiu ;

solutie 0,01 M NaOH

solutie fenolftaleina

In doua pahare Erlenmayer se pipeteaza cate :

In paharul notat 1 ( proba ) se adauga :

In paharul notat 2 ( martor ) se adauga :

Se titreaza continutul celor doua pahare cu solutie 0 M NaOH in prezenta de fenolftaleina

Calcul

Activitate lipazica U/mg = ( Vp - V_M ) · 0,01 · 1000 /mg preparat