Home - Rasfoiesc.com
Educatie Sanatate Inginerie Business Familie Hobby Legal
Doar rabdarea si perseverenta in invatare aduce rezultate bune. stiinta, numere naturale, teoreme, multimi, calcule, ecuatii, sisteme


Biologie Chimie Didactica Fizica Geografie Informatica
Istorie Literatura Matematica Psihologie

Biologie


Index » educatie » Biologie
DETERMINAREA NUMARULUI TOTAL DE DROJDII SI MUCEGAIURI


DETERMINAREA NUMARULUI TOTAL DE DROJDII SI MUCEGAIURI




DETERMINAREA NUMARULUI TOTAL DE DROJDII SI MUCEGAIURI

DEFINITII

Drojdii - microorganisme eucariote, mono sau pluricelulare, care se reproduc asexuat prin inmugurire sau, mai rar, prin sciziune. Unele drojdii se pot reproduce si sexuat (meioza). Majoritatea drojdiilor sunt saprofite si multe dintre ele au activitate fermentativa.

Mucegaiuri - microorganisme eucariote, care prezinta organe de reproducere diferentiate. Sunt agentii mucegairii.




Tipuri de produse alimentare pentru care se recomanda analiza (Anexa 1)

PRINCIPIUL METODEI

Prin aceasta metoda, numarul de drojdii si mucegaiuri se apreciaza indirect, pe baza coloniilor generate de celulele acestor microorganisme prezente in proba de analizat, care se formeaza cand proba sau o dilutie a acesteia vine in contact cu un mediu nutritiv gelozat, dupa termostatare la 25C timp de 72 de ore.

ECHIPAMENTE

         Omogenizator

         Balanta analitica

         Termostat reglat la 25C

         Baie de apa pentru fluidificarea mediului de cultura reglata la 45C

MATERIALE SI STICLARIE

         25g produs alimentar

         225 ml 0.1% apa peptonata

         Cutii Petri Φ10 cm sterile

         Pipete de 1 cm3 si 10 cm3 sterile

         Eprubete cu ser fiziologic steril, cate 9 cm3 per eprubeta

         Baloane cu ser fiziologic steril

         Pungi sterile pentru omogenizarea probelor solide sau semisolide

         Numarator de colonii

Reactivi pentru determinare

Mediu de diluare: Solutie ser fiziologic

Mediu de cultura: Anexa 2

DESCRIEREA MODULUI DE LUCRU

Se cantaresc 25 g proba produs alimentar, peste care se adauga 225 ml apa peptonata. Se omogenizeaza timp de 1 min.

Pentru diluarea probei se aplica schema de dilutie din figura 1.

Figura 1 Schema de lucru pentru realizarea dilutiilor si inocularea probelor

*Toate probele se realizeaza in duplicat.

Cu o pipeta sterila se transfera in fiecare cutie Petri sterila, cate 1 cm2 proba de analizat, daca produsul este lichid sau cate 1 cm2 dilutie initiala, in cazul altor produse. Se realizeaza apoi prima dilutie decimala a probei de analizat (10-1). Se repeta aceste operatii cu dilutiile urmatoare, folosind cate o noua pipeta sterila pentru fiecare dilutie decimala (Fig.1).

Se toarna in fiecare cutie Petri cate cca. 15 cm2 mediu PCA (Plate Count Agar) cu temperatura de 455C.

Mediile se uniformizeaza rapid in placi, prin rotirea placilor in plan orizontal, apoi sunt lasate in repaus pana se produce solidificarea lor.

* Se noteaza pe capacul placilor numele probei, mediul utilizat, dilutia inoculata, temperatura la care se va face termostatarea.

Dupa solidificarea mediului placile se termostateaza cu capacul in jos, pentru 3-5 zile la temperatura de 25-28C.

REZULTATE

Se retin cutiile care contin 15.300 de colonii. Numarul de ufc de drojdii si mucegaiuri per ml sau gram de produs se calculeaza ca medie ponderata, cu formula urmatoare:

unde

ΣC - suma coloniilor numarate in toate cutiile retinute;

n1 - numarul de cutii retinute dintr-o dilutie

n2 - numarul de cutii retinute din dilutia succesiva

d - factorul de dilutie corespunzator primei dilutii din care s-a realizat retinerea placilor.

Rezultatele calculate se rotunjesc la doua cifre semnificative.

Se exprima gradul de contaminare printr-un numar cuprins intre 1,0 si 9,9 multiplicat cu 10x, unde x este puterea atribuita lui 10.

Daca cele doua cutii Petri, la nivelul probei de analizat (produse lichide) sau al dilutiei initiale (alte produse) contin mai putin de 15 colonii, se face media aritmetica, m, a coloniilor numarate in cele doua cutii.

Rezultatul se exprima sub forma:

- numar de ufc de drojdii si mucegaiuri estimat per ml:

NE=m (produse lichide)

- numar de ufc de drojdii si mucegaiuri estimat per gram

NE=md-1 (alte produse), in care d este factorul de dilutie al dilutiei initiale (alte produse).

Daca cele doua cutii Petri , la nivelul probei de analizat (produse lichide) sau al dilutiei initiale (alte produse) nu contin nicio colonie, rezultatul se exprima sub forma:

-                     mai putin de o ufc de drojdii sau mucegaiuri per ml (produse lichide);

-                     mai putin de 1d-1 ufc de drojdii sau mucegaiuri pe gram (alte produse)

ANEXA 1

GRUPELE PRINCIPALE DE PRODUSE PENTRU CARE SE RECOMANDA ANALIZA

Nr.crt.

Grupe de produse

1. 

Paine si produse de panificatie

2. 

Produse lactate acide si branzeturi




3. 

Carne si produse din carne

4. 

Uleiuri, grasimi si seminte oleaginoase

5. 

Fructe. Legume si produse prelucrate

6. 

Bauturi alcoolice

7. 

Bauturi nealcoolice

8. 

Fainuri proteice, furaje , sroturi

9. 

Zahar si produse zaharoase

10. 

Cereale si produse din cereale

11. 

Produse de cofetarie si patiserie

12. 

Condimente, supe, sosuri, salate

ANEXA 2

CONDITII DE CULTIVARE SI COMPOZITIA MEDIILOR DE CULTURA PENTRU NUMARAREA MICROORGANISMELOR

Conditiile particulare de lucru conform prevederilor din normativele romanesti adaptate la conditiile ISO (SR ISO) sunt prezentate in tabelul 1.

Tabelul 1. Conditii de cultivare pentru numararea microorganismelor impuse de normativele ISO

Grup de microorganisme

Medii de cultura

Conditii de termostatare

Temperatura/timp

Numar total de microorganisme aerobe, care se dezvolta la 30ºC (bacterii, drojdii si mucegaiuri)

-  PCA

30ºC/72h 3h

Drojdii si mucegaiuri

-  YGC

-  OGA (OGYE)

25ºC/5 zile

Compozitia mediilor de cultura recomandate pentru evaluarea diferitelor categorii de microorganisme este prezentata in tabelul 2.

Tabelul 2. Compozitia mediilor de cultura recomandate pentru determinarea si confirmarea numarului de unitati formatoare de colonii

Indicator microbiologic

Compozitie medii de cultura, gl-1

Numar total de microorganisme

PCA

(engl. Plate count agar1);

SMA- Standard methods agar2))

Triptona 5,0g

Extract de drojdie 2,5g

Glucoza anhidra.. 1,0

Agar-agar.. 12,0-18,0g

Apa pana la . 1000ml

pH=7,2

Mediul este disponibil comercial.

Drojdii si mucegaiuri

YGC

(Extract de drojdie, glucoza, cloramfenicol agar )

Extract de drojdie 5g

Glucoza. 20g

Cloramfenicol. 0,1g

Agar-agar. 15g

Apa pana la. 1000 ml

pH=6,6

OGA (OGYE)

(Oxitetraciclina glucoza agar)

Extract de drojdie 5g

Glucoza. 20g

Agar-agar. 16g

Apa pana la.. 1000ml

pH=7,2

in momentul utilizarii, in mediul fluidificat se adauga 100 ml solutie 1mg/ml oxitetraciclina.

Geloza nutritiva (geloza alba)

Agar-agar. 12.18g

Apa pana la 1000 ml







Politica de confidentialitate


Copyright © 2019 - Toate drepturile rezervate

Biologie


Biochimie
Biofizica
Botanica


NUCLEUL
Helix aspersa Mller, 1774 (genul Cryptomphalus)
Subincrengatura MANDIBULATaA
Helix aperta Born, 1778 (genul Cantareus)
DETERMINAREA NUMARULUI TOTAL DE DROJDII SI MUCEGAIURI
Achatina fulica Bowdich, 1822
TESUTURI VEGETALE
BIOLOGIE CELULARA, FORME CELULARE
TESUTUL OSOS
Polenizarea si fecundarea la plante