Home - Rasfoiesc.com
Educatie Sanatate Inginerie Business Familie Hobby Legal
Ca sa traiesti o viata sanatoasa.vindecarea bolilor animalelor, protectia si ingrijirea, cresterea animalelor, bolile animalelor




Alimentatie Asistenta sociala Frumusete Medicina Medicina veterinara Retete

Medicina


Index » sanatate » Medicina
DETERMINAREA ACTIVITATII AMILAZEI SERICE


DETERMINAREA ACTIVITATII AMILAZEI SERICE


DETERMINAREA ACTIVITATII AMILAZEI SERICE

Amilaza , 1,4-glucanhidrolaza ( E.C.3.2.1.1. ) catalizeaza hidroliza polizaharidelor solubile formate din unitati de glucoza legate prin legaturi α 1-4 glucozidice .

Amilaza actioneaza asupra amidonului prin scindarea legaturilor

1-4 glucozidice , producand fragmentarea substratului in molecule mai mici : dextrine , maltodextroze , maltoza , glucoza . In functie de greutatea moleculara a dextrinelor rezultate , acestea dau cu iodul coloratii diferite , dupa cum urmeaza :

Albastru - amilodextrine

Rosu - eritrodextine

Galben - flavodextrine

Dextrinele cu mase moleculare mici ( acrodextrine ) nu dau reactii de culoare cu iodul .

Principiul metodei

Amidonul ramas nehidrolizat in urma actiunii enzimei din proba biologica este dozat colorimetric cu iod .

Reactivi

Substrat tamponat : 13,3 g Na2HPO4 si 4,3 g acid benzoic . Se dizolva in 250 ml apa distilata la fierbere . Se adauga 5 ml suspensie rece continand 200 mg amidon . Se lasa sa se raceasca . Se aduce la 500 ml cu apa distilata . Se pastreaza la 40C ( solutia trebuie sa fie limpede ) .

Solutie stoc iod : 3,56 g KIO3 si 45 g KI . Se dizolva in 800 ml apa distilata . Se adauga prin picurare 9 ml solutie HCl 12 M agitand continuu . Se aduce la 1 l cu apa distilata . Se pastreaza la + 40C timp de maxim un an .

Solutie de iod pentru determinari : Se face o dilutie din solutia stoc 1:10 cu apa distilata . Se pastreaza la + 40C timp de maxim un an .

Solutie acid clorhidric 1 N .

Mod de lucru

Se folosesc baloane cotate de 25 ml .

Reactivi ( ml )

Proba

Martor



Substrat

Preincubare 15 minute la 370C

Solutie amilaza din comprimat

Incubare 7,5 minute la 370C . Racire pe gheata

Acid clorhidric 1 N

Apa distilata

Solutie iod determinari

Solutie amilaza din comprimat

Se aduc ambele baloane la cota cu apa distilata

Se citeste absorbanta la 660 nm fata de apa distilata

Calcul

( AM - AP ) / AM x 800 = unitati amilazice /dl proba







Politica de confidentialitate





Copyright © 2024 - Toate drepturile rezervate