Home - Rasfoiesc.com
Educatie Sanatate Inginerie Business Familie Hobby Legal
Doar rabdarea si perseverenta in invatare aduce rezultate bune.stiinta, numere naturale, teoreme, multimi, calcule, ecuatii, sisteme


Biologie Chimie Didactica Fizica Geografie Informatica
Istorie Literatura Matematica Psihologie

Biologie


Index » educatie » Biologie
Efectuarea preparatelor microscopice


Efectuarea preparatelor microscopice




Efectuarea preparatelor microscopice

Tehnica efectuarii frotiului

1 ) Etalarea

din cultura bacteriana in mediu lichid se preleva cu ansa o picatura si se etaleaza in centrul lamei, in strat cat mai subtire, prin miscari circulare  excentrice pe suprafata de 1-2 cm2 fara a atinge marginile lamei;




din cultura pe mediu solid se preleva o cantitate numai prin atingerea unei colonii ( doar varful coloniei ! ) cu ansa si se depune in centru lamei langa o picatura de apa distilata sterila. Se omogenizeaza progresiv cultura in picatura de apa si se etaleaza;

prelevatele patologice fluide se etaleaza procedand ca pentru cultura in mediu lichid.

pentru produsele patologice fibrinoase se evita miscarile de du-te vino ale ansei pe aceeasi suprafata. Se depune in centrul lamei un mic flocon fibrino- purulent care se intinde in strat cat mai subtire prin miscari radiare si excentrice;

2) Uscarea

frotiurile se usuca. Se prefera uscarea rapida la bec de gaz

3) Fixarea

fixarea se face prin caldura: se trece lama cu frotiul in sus, cateva secunde prin flacara unui bec de gaz. Dosul mainii trebuie sa suporte atingerea lamei astfel incalzite. O incalzire mai puternica poate carboniza frotiul.

Colorarea frotiurilor

Coloratia Gram

se pune lama cu frotiul in sus pe stativul de colorare;

se coloreaza frotiul 30 sec 1 min cu solutie de violet de gentiana ( colorare)

se varsa colorantul, se spala lama cu apa de robinet

se acopera lama cu solutie Lugol

( fixare) proaspata si se mentine 30 sec- 1 min;

se scurge solutia Lugol si se acopera lama cu solutia de decolorare (alcool- acetona) imprimandu- i miscari alternative de inclinare pana cand preparatul nu mai elibereaza colorant: cca 5- 10 sec pentru frotiurile subtiri, cca 10 sec pentru cele mai groase. Se stopeaza decolorarea prin spalare ingrijita cu apa.

se recoloreaza cu solutie de fucsina bazica timp de 30 sec. Pentru hemofili se prelungeste la 1- 2 min.

S.aureus

Group A, Streptococcus pyogenes

Sputum smear 
Staphylococcus & Streptococcus pneumoniae

Escherichia coli/PMN



Peritoneal fluid Mixed 
anaerobic infection

Urethral smear, 
Neisseria gonorrhoeae

STEP 1:

Flame slides to heat fix

Flaming Slides(13654 bytes)

STEP 2:

Flood the entire slide with   Fuchsin

Ensure enough stain is added to keep the slides covered throughout the entire staining step.

Microscope/View Slide(1041 bytes)

Adding Carbol Fuchsin(10195 bytes)

Carbol Fuchsin on Slides(10444 bytes)

STEP 3:

Using a Bunsen burner, heat the slides slowly until they are steaming.  Maintain steaming for 5 minutes by using low or intermittent heat (i.e. by occasionally   passing the flame from the Bunsen burner over the slides)  

Caution: Using too much flame or heat can cause the slide to break.

Microscope/View Slide(1041 bytes)

Flaming Carbol Fuchsin on slides(13653 bytes)

STEP 4:

Rinse the slide with water.

Washing off Carbol Fuchsin (12514 bytes)

STEP 5:

Flood the slide with 3% acid-alcohol and allow to decolorize for 5 minutes.

Throughout the 5 minutes, continue to flood the slides with 3% acid-alcohol until the slides are clear of stain visible to the naked eye. 

To the right are examples of slides insufficiently and sufficiently flooded with 3% acid-alcohol.

Microscope/View Slide(1041 bytes)

Adding 3% Acid Alcohol (12272 bytes)

Example of insufficient flooding with Acid Alcohol(26362 bytes)

Example of sufficient flooding with Acid Alcohol (26298 bytes)

STEP 6:

Rinse the slide thoroughly with water and then drain any excess from the slides.

Washing Acid-Alcohol From Slides (9727 bytes)

STEP 7:

Flood the slide with the counterstain, Methylene Blue.  Keep the counterstain on the slides for 1 minute.

Microscope/View Slide(1041 bytes)

Adding Methylene Blue to Slides(10117 bytes)

STEP 8:

Rinse the slide thoroughly with water.

Washing Methylene Blue from Slides(10693 bytes)

If all steps are performed correctly you should have a slide that looks like this.

AFB Stained by Ziehl-Neelsen Staining Procedure(33922 bytes)

Frotiu din produs patologic

Frotiu din cultura




loading...




Politica de confidentialitate


Copyright © 2020 - Toate drepturile rezervate

Biologie


Biochimie
Biofizica
Botanica


Subincrengatura MANDIBULATaA
Aparatul urinar
Consideratii generare asupra speciei oxycarenus lavaterae
Consideratii generale asupra microbiotei alimentelor.
Celule musculare cu receptori
TRANSMITEREA SINAPTICA
Sisteme de clasificare a lumii vii
GLANDELE SEBACEE MODIFICATE
SINAPSELE NEURONALE
Organite nedelimitate de endomenbrana














loading...